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HE染色試劑盒 | |||
名稱 | 規(guī)格 | 保存 | |
試劑(A):伊紅 | 100ml | 500ml | 室溫 |
試劑(B):蘇木素 | 100ml | 500ml | 室溫 |
試劑(C):分化液 | 100ml | 500ml | 室溫 |
說明書 | 1份 |
染色原理:
蘇木素-伊紅染色法 ( Hematoxylin-Eosin staining ),簡稱HE染色法 ,切片技術(shù)里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。染色過程需要優(yōu)化,著色的情況與組織或細(xì)胞的種類有關(guān),也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,很多細(xì)胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當(dāng)其衰老時或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時,伊紅著色由淺變深。產(chǎn)品所包含試劑均為工作液,可直接使用。
染色方法及操作步驟:
(1) 新鮮取材,經(jīng)固定后,常規(guī)石蠟包埋,切片3-5um
(2) 常規(guī)脫蠟至水
(3) 蘇木素染液染色5-10min(具體時間根據(jù)染色結(jié)果和實驗要求調(diào)整),蒸餾水洗去浮色(適度)
(4) 分化液分化10-60s,自來水滴加或浸洗2次,每次3-5min
(5) 浸入95%乙醇數(shù)秒,取出切片滴加伊紅染液30s-3min,傾去多余染色液后快速脫水
(6) 脫水,透明,封片:
① 梯度乙醇95%兩遍各浸洗10s,100%乙醇(Ⅰ和Ⅱ)各浸洗1-3min,100%乙醇(Ⅲ)浸洗1-3min
② 二甲苯透明三次,1-3min/次,中性樹膠封固,鏡下觀察
染色結(jié)果:
蘇木素染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著藍(lán)色至紫藍(lán)色;伊紅為酸性胞質(zhì)性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。
注意事項:
(1) 使用前應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書,并在產(chǎn)品使用期限內(nèi)使用;
(2) 產(chǎn)品需按照存放溫度保存,如果保存溫度低于15℃,蘇木素染液中可能有結(jié)晶析出,一般不影響產(chǎn)品質(zhì)量,但可能會減少染色切片數(shù)量;如果保存溫度高于30℃,會加快蘇木素的氧化速度,導(dǎo)致染色能力下降,同時伊紅染液的揮發(fā)程度會加快的;
(3) 蘇木素和伊紅的適宜染色時間需根據(jù)用戶樣本實驗測試;
(4) 本產(chǎn)品可重復(fù)使用,當(dāng)組織或細(xì)胞著色明顯偏淺或顏色異常時請更換新的染液;
(5) 冰凍切片建議調(diào)整各環(huán)節(jié)的實驗條件;
(6) 操作時請穿實驗服,戴一次性手套。禁止口鼻吸入,避免皮膚、黏膜直接接觸試劑。如果不慎接觸到敏感部位,應(yīng)及時用大量清水沖洗。