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普魯士藍(lán)染色試劑盒 | |||
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存 | |
試劑(A):普魯士藍(lán)甲液 | 50ml | 100ml | 室溫,避光 |
試劑(A):普魯士藍(lán)乙液 | 50ml | 100ml | 室溫 |
試劑(B):核固紅染液 | 50ml | 100ml | 室溫,避光 |
儲(chǔ)存條件:常溫避光保存,有效期1年。
染色原理:
含鐵血黃素(Hemosiderin)是一種血紅蛋白源性色素,為金黃色或棕黃色顆粒,因其含鐵、金黃色,故稱為含鐵血黃素。當(dāng)紅細(xì)胞被巨噬細(xì)胞吞噬后,在溶酶體酶的作用下,血紅蛋白被分解為不含鐵的橙色血質(zhì)和含鐵的含鐵血黃素。
Perls普魯士藍(lán)反應(yīng)(Prussian blue reaction)又稱為含鐵血黃素染色,亞鐵氰化鉀溶液使三價(jià)鐵離子從蛋白質(zhì)中被稀鹽酸分離出來,三價(jià)鐵與亞鐵氰化鉀反應(yīng),生成一種不溶解的藍(lán)色化合物即三價(jià)鐵的亞鐵氰化物普魯士藍(lán),因此該反應(yīng)被稱為普魯士藍(lán)反應(yīng)。
染色方法及操作步驟:
(1) 常規(guī)脫蠟至水
(2) 等量普魯士藍(lán)A、B液混合形成普魯士藍(lán)工作液,室溫染色10-60min(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)
(3) 傾去染液,切片入純水浸洗3次
(4) 滴加核固紅染色液染色3-10min
(5) 自來水洗至切片流水呈無色即可
(6) 逐級(jí)酒精脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固
染色結(jié)果:
含鐵血黃素呈藍(lán)色,細(xì)胞核呈紅色。
注意事項(xiàng):
(1) 沖洗過程中使用蒸餾水沖洗,防止自來水中的鐵離子在染色中反應(yīng),造成假陽性;
(2) 在操作過程中確保所用容器干凈,最好使用玻璃器皿,避免使用鐵制容器;
(3) 普魯士藍(lán)工作液現(xiàn)配現(xiàn)用;
(4) 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并帶一次性手套操作。