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軟骨番紅固綠染色試劑盒 | ||||
名稱 | 規(guī)格 | 保存 | ||
試劑(A):weight鐵蘇木素染液 | A1:Weigert 甲液 | 25ml | 50ml | 室溫,避光 |
A2:Weigert 乙液 | 25ml | 50ml | 室溫,避光 | |
試劑B):分化液 | 50ml | 100ml | 室溫 | |
試劑(C):固綠染液 | 50ml | 100ml | 室溫,避光 | |
試劑(D):弱酸 | 50ml | 100ml | 室溫 | |
試劑(E):番紅O染液 | 50ml | 100ml | 室溫,避光 | |
說明書 | 1份 |
儲(chǔ)存條件:常溫避光保存,有效期1年。
染色原理:
軟骨組織由軟骨細(xì)胞、軟骨基質(zhì)和軟骨纖維組成,軟骨組織及其周圍的軟骨膜構(gòu)成軟骨。軟骨根據(jù)基質(zhì)內(nèi)含纖維素成分不同分為透明軟骨、彈性軟骨、纖維軟骨。軟骨染色方法有很多種,例如阿利新藍(lán)法及甲苯胺藍(lán)等。
番紅O是一種結(jié)合多陰離子的陽離子染料,其顯示軟骨組織是基于陽離子染料與多糖中陰離子基團(tuán)(硫酸軟骨素或硫酸角質(zhì)素)結(jié)合。嗜酸性的骨組織和酸性染料固綠結(jié)合而呈綠色或藍(lán)色。番紅固綠染色可直觀反映關(guān)節(jié)軟骨、軟骨下的骨組織結(jié)構(gòu),軟骨呈紅色,成骨呈綠色,對比鮮明,區(qū)分清晰。
染色方法及操作步驟:
(1) 常規(guī)脫蠟至水
(2) 將weight鐵蘇木素的甲、乙液等量混合(現(xiàn)配現(xiàn)用,不可提前配制保存),切片入混合液內(nèi)浸染3-5min,流水稍洗
(3) 分化液分化5-15s,蒸餾水稍洗
(4) 固綠(軟骨)染液染1-5min
(5) 分化液分化5-15s,蒸餾水稍洗
(6) 番紅O(軟骨)染液染2-5min
(7) 逐級酒精脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固
染色結(jié)果:
軟骨呈紅色,成骨呈綠色。
注意事項(xiàng):
(1) 臨用前,Weigert鐵蘇木素甲、乙液等份混合,不宜預(yù)先配制以避免染色力降低;
(2) 切片在番紅染液中不易太長,否則背景深紅不易分化掉;
(3) 固綠染色通過鏡下觀察成骨呈明顯綠色、軟骨著色很淺或無色控制分化時(shí)間,以背景呈綠色為宜;
(4) 95%乙醇脫水不宜過長,以免脫去番紅顏色。
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并帶一次性手套操作。