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髓鞘染色試劑盒 | |||
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存 | |
試劑(A):LFB染色液 | 50ml | 100ml | 室溫,避光 |
試劑(B):分化液 | 50ml | 100ml | 室溫 |
試劑(C):伊紅醇溶液 | 50ml | 100ml | 室溫 |
說明書 | 1份 |
儲(chǔ)存條件:常溫避光保存,有效期1年。
染色原理:
堅(jiān)牢藍(lán)(Luxol Fast Blue)屬于銅-酞箐染料,在酒精溶液中具有與髓鞘磷脂結(jié)合的染色特性。應(yīng)用LFB髓鞘染色可以顯示出神經(jīng)組織的髓鞘結(jié)構(gòu)。
染色方法及操作步驟:
(1) 常規(guī)脫蠟至水
(2) 將LFB染色液放入60℃烘箱提前預(yù)熱30分鐘,然后將切片浸入LFB染色液在60℃條件下染色1-2小時(shí)(或?qū)⑶衅隠FB染色液室溫孵育24小時(shí))
(3) 切片取出冷卻至室溫,浸入自來水中水洗數(shù)十秒至脫去浮色
(4) 分化液分化,直到灰質(zhì)和白質(zhì)區(qū)分清楚為止
(5) 取出切片立即置于70%乙醇中快速分化,及時(shí)鏡檢直到灰質(zhì)和白質(zhì)區(qū)分清楚為止,然后水洗終止分化
(6) 取出切片置于95%乙醇中數(shù)秒,隨后浸入伊紅醇溶液中數(shù)秒,直到背景呈紫紅色
(7) 逐級(jí)酒精脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固
染色結(jié)果:
髓鞘呈藍(lán)色,背景呈紫紅色。
注意事項(xiàng):
(1) LFB染色液預(yù)熱很重要,染液溫度會(huì)對(duì)組織著色的強(qiáng)弱有一定影響;
(2) 切片經(jīng)染液A染色水洗后,需要盡快分化,避免組織干片;
(3) 在顯微鏡下進(jìn)行分化;
(4) 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并帶一次性手套操作。